Gram
31/08/2016
Nivel de manejo del médico general: Emplea informe
Tinción de Gram
1. Definición
La tinción de Gram es un tipo de tinción de contraste o tinción diferencial que se utiliza en la práctica clínica para clasificar las bacterias en dos grandes grupos, las Gram-negativas y las Gram-positivas según la composición de su pared celular y su capacidad para captar y retener las tinciones. Son bacterias gram positivas aquellas que poseen una membrana plasmática única rodeada por una gruesa pared celular compuesta principalmente por varias capas de peptidoglicano, mientras que las gram negativas son aquellas que poseen dos membranas plasmáticas y entre ellas una delgada pared celular compuesta por pocas capas de peptidoglicano.
También tiñe ciertas levaduras.
Es una de las tinciones más utilizadas universalmente debido a lo económico, sencillo y eficaz que resulta.
2. Forma en que se realiza
Toda tinción diferencial requiere el uso de al menos 3 reactivos químicos que se aplican en secuencia a un frotis fijado por calor. El primer reactivo es llamado tinción primaria o colorante primario. Su función es impartir color a todas las células. Con el objetivo de establecer un contraste de color, el segundo reactivo usado es un agente decolorante, el cual puede decolorar la célula completa o solo parte de ella. El reactivo final, el colorante de contraste, le da a las células decoloradas un color que contrasta con el del colorante primario. El colorante de contraste no puede ser absorbido por células que no han perdido el colorante primario. De esta manera, tipos de células o sus estructuras se pueden distinguir unas de otras en función del colorante que es absorbido.
Para la tinción Gram, se utilizan los siguientes compuestos:
- Tinción Primaria: Se utiliza Cristal Violeta, que tiñe todas las células moradas.
- Mordiente: Yodo o lugol. El yodo, aparte de matar bacterias, incrementa la afinidad del colorante primario con la célula, formando complejos insolubles con este. El complejo cristal violeta-yodo sirve para intensificar el color del teñido.
- Agente decolorante: Se utiliza alcohol etílico al 95%. El etanol tiene doble función: deshidratante de proteínas y solvente de lípidos. El alcohol disuelve los lípidos de la parte externa de la pared celular Gram-negativa, haciendo la pared más porosa. De esta manera, el complejo Cristal violeta-yodo es removido de la capa de peptidoglicano más fina de las bacterias Gramnegativas, mientras que la pared más gruesa de las Gram-positivas retiene el tinte en su interior.
- Tinción de Contraste: Safranina. Este tinte se utiliza para teñir de rojo las células previamente decoloradas, o sea, las Gram-negativas.
No todas las bacterias se pueden teñir por esta técnica, ya que carecen de pared celular (mycoplasma) o su pared celular tiene una composición química diferente (micobacterias, que cuentan con una gran cantidad de ácidos micólicos)
Las muestras útiles para su uso son líquidos estériles, biopsias para cultivo, abscesos, hisopados, crecimiento de colonias aisladas en medios de cultivo.
3. Indicaciones
La tinción de Gram puede indicarse como diagnóstica por sí sola o para guiar el manejo clínico de un paciente a la espera de los resultados de un cultivo microbiológico en el estudio de un paciente con infección clínica o subclínica. Todos los cultivos van acompañados de una tinción Gram.
4. Contraindicaciones
No posee
5. Resultados
Indica la presencia de bacterias intra o extra celulares, si son Gram positivas o negativas, además de su cantidad, morfología y agrupación
6. Interpretación
Para su interpretación se debe tener en cuenta el cuadro clínico del paciente más el origen de la muestra. La tinción solo entrega aspectos físicos de la bacteria (tinción, agrupación y morfología) por lo que siempre es orientadora (y no diagnóstica) de un agente etiológico.
El único caso en el cual la tinción Gram es diagnóstica por si sola es en el estudio de un hombre con sospecha de uretritis gonococcica, en quien el resultado de diplococos gram negativos intracelulares es suficiente para establecer el diagnóstico.
Muestra de sitios estériles: se consideran sitios estériles el líquido cefalorraquídeo, líquido pleural, líquido pericárdico, líquido sinovial y líquido peritoneal. La presencia de cualquier agente en cualquiera de estas muestras es significativa
Muestra de sitios no estériles: se incluyen por ejemplo el frotis de garganta, frotis de la herida y frotis genitales. En este caso es usual encontrar flora normal, células epiteliales y leucocitos.
7. Signos de alarma
No se describen para este examen
8. Riesgos
No se describen para este examen
9. Bibliografía
Revisor(a):
Validador(a):
Última Modificación:
Artículo no ha tenido modificaciones