Tinción de Gram

Nivel de manejo del médico general: Realizar.

INTRODUCCIÓN:

Método de tinción diferencial utilizado para diferenciar entre microorganismos bacterianos Gram positivos y Gram negativos. Cada uno de los grupos responde de forma diferente a cada tipo de antibióticos, por eso es una técnica útil para seleccionar el fármaco antimicrobiano inicial ante una infección.

INDICACIONES:

• Identificación preliminar de la bacteria causal de una infección (neumonía, ITU, uretritis, meningitis, exudado vaginal, abscesos, sepsis, etc.).

CONTRAINDICACIONES:

• No tiene.

MATERIALES E INSUMOS:

• Reactivos: cristal violeta (colorante), lugol de Gram (mordiente), alcohol-acetona (decolorante), fucsina básica o safradina (colorante de contraste).
• Portaobjetos.
• Mechero.
• Aceite de inmersión.
• Microscopio.

PROCEDIMIENTO:

1. Realizar extendido delgado de la muestra sobre un portaobjetos y dejar secar al aire.

2. Fijar el material de estudio al portaobjetos pasándolo 2 o 3 veces por la llama de un mechero (evitar sobrecalentamiento).

3. Colocar la placa en un soporte y cubrirla con cristal violeta por un minuto.

4. Lavar con agua corriente.

5. Cubrir la placa con lugol de Gram durante un minuto.

6. Lavar con agua corriente.

7. Cubrir la placa con alcohol-acetona durante 5 segundos.

8. Lavar con agua corriente.

9. Cubrir la placa con fucsina o safradina durante un minuto.

10. Lavar con agua corriente.

11. Dejar secar al aire.

12. Observar al microscopio con aceite de inmersión, objetivo 100x, condensador totalmente abierto.

BIBLIOGRAFÍA:

1. http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-13399