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1.- Definición del exámen

La Detección de antígeno de Cryptococcus (CrAg) es un exámen que evalúa la presencia de polisacáridos capsulares del microorganismo en sangre o en líquido cefalorraquídeo (LCR), y se realiza mediante análisis bajo técnicas de inmunodiagnóstico (Aglutinación en Látex, ELISA, LFA).

Además se realiza una correlación con estudio citoquímico e histológico, para lo que idealmente se realiza Tinción con Tinta China que permite la visualización del microorganismo en LCR.

2.- Forma de realización del examen

Se realiza a través del análisis de una muestra de LCR obtenida a través de una punción lumbar.

La detección del CrAg se realiza debido a la solubilización de los polisacáridos capsulares durante la infección en LCR, suero u orina, lo que puede ser detectado por inmunoensayos enzimáticos o por aglutinación de partículas de látex recubiertas en anticuerpos de estos polisacáridos .

La detección con Tinta China se realiza mediante la visualización microscópica directa del Cryptococcus a través de la tinción del LCR con Tinta China en un portaobjetos.

3.- Cuáles son las indicaciones del exámen

Detección de antígeno de Cryptococcus en LCR y en Tinta China

Ambos exámenes se utilizan para:

• Estudio de sospecha de Meningoencefalitis por Cryptococcus, ante la aparición de los siguientes síntomas o signos clínicos:
  • Cefalea.
  • Confusión.
  • Letargia.
  • Obnubilación.
  • Coma.
  • Temperatura normal o levemente elevada.
  • Nausea y Vómitos (con aumento de la presión intracraneana).
  • Fiebre y Rigidéz de nuca (con una respuesta inflamatoria agresiva; poco común).
  • Visión borrosa, fotofobia y diplopia.
  • Defectos auditivos, convulsiones, ataxia, afasia y movimientos coreoatetoides.

4.- Contraindicaciones del examen:

Cuando se sospecha Cryptococcosis del SNC, especialmente en pacientes quienes presentan déficit neurológico focal o una historia comatible con meningitis léntamente progresiva, se debe considerar la obtención de una tomografía compuada o resonancia magnética cerebral previo a la realización de la punción lumbar, debido a que si se identifica una masa cerebral, esta no debe ser realizada para obtener LCR; En este caso se debe derivar al paciente para evaluación por neurocirugía para realización de algún procedimiento alternativo.

5.- Resultado que entrega el exámen:

La deteccion de CrAG (+) en LCR apoya fuertemente el diagnóstico de meningitis por Cryptococcus.

En la tinción del LCR con Tinta China se observa la presencia del Cryptococcus.

6.- Interpretación del resultado de exámen:

La detección de CrAg en altamente sensible y específica en LCR y es comúnmente detectada por aglutinación en látex, y sus falsos positivos pueden ser por detección del hongo Trichosporon asahii o de la bacterias del género Stomatococcus y Capnocyphaga, pero estos son usualmente con títulos bajos. Una detección de antígenos en LCR en tìtulos > 1:1024 es un predictor de muerte durante las semanas iniciales de tratamiento.

En el caso de la detección del Cryptococcus bajo microscopía con tinción con Tinta China se puede objetivar la presencia de típicos organismos redondeados, encapsulados, con morfología de levaduras, consistente con cryptococcus en 60-80% de los pacientes

Fuente: Brooks GF, Carroll KC, Butel JS, Morse SA Mietzner TA; Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical Microbiology, 25th Edition.

7.- Signos de alarma:

La detección de CrAg (+) en LCR o detección del microorganismo por Microscopía con Tinta China apoya fuertemente el diagnóstico de meningitis por Cryptococcus, y es evidencia suficiente para iniciar tratamiento en pacientes sintomáticos y/o con factores de riesgo que son consistentes con infección.

A pesar de los resultados de la microscopía con Tinta China, siempre debe solicitarse CrAg en sangre y LCR, además de la realización de cultivos para Cryptococcus.

8.- Riesgos del examen

Los riesgos de examen provienen de las complicaciones de la realización de una Punción lumbar, los cuales son:

• Cefalea post-PL
• Punción hemorrágiaca
• Punción seca
• Infección
• Hemorragia
• Disestesia
• Hernia Cerebral Post-PL

9.- Bibliografía

1. Cox, G, MD, et al. Epidemiology, clinial manifestations, and diagnosis of Cryptococcus neoformans meningoencephalitis in HIV-infected patients. In: UpToDate, Post TW (Ed), UpToDate, Waltham, MA. (Accessed on August 29, 2016.)
2. King, J, MD, et al. (2016, February 29). Cryptococcosis. Retrieved August 29, 2016, from http://emedicine.medscape.com/article/215354-overview.
3. Brooks, G, Jawetz, E, Melnick, J and Adeberg, E. (2010). Jawetz, Melnick & Adelberg’s Medical Microbiology. Stamford, CT: Appleton & Lange. Ch 45, Medical Micology.
4. Shlamovitz, G, MD. (2016, April 22). Lumbar Puncture. Retrieved August 29, 2016, from http://emedicine.medscape.com/article/80773-overview

Titulo: Pruebas de aglutinación para agentes de meningitis. Nivel: Interpreta y emplea. 

1.- Definición del exámen

Las pruebas de aglutinación de latex son exámenes que permiten identificar el agente etiológico en caso de meningitis bacterianas en un corto periodo de tiempo (aproximadamente 2 horas). Se basa en la detección de antígenos bacterianos específicos (de la capsula o capa externa de la pared) que son liberados por las bacterias durante su desarrollo, que al contacto con las partículas de latex (previamente sensibilizadas por anticuerpos específicos), producen una reacción de aglutinación. 

2.- Forma de realización del examen

Se realiza a través del análisis de una muestra de líquido cefaloraquideo obtenida mediante punción lumbar.   

3.- Cuáles son las indicaciones del exámen

Este examen se realiza para el diagnóstico temprano de meningitis bacteriana. Si bien no reemplaza el diagnóstico mediante cultivo bacteriano, presenta la ventaja de ser más rápido y no alterarse en caso de que el paciente haya recibido antibióticos previamente. Este examen debe ser solicitado ante la sospecha de meningitis. Los signos y síntomas derivados de la irritación meníngea que nos orientan en sospechar esta entidad son: rigidez de nuca, signo de Brudzinski y signo de Kernig.

4.- Contraindicaciones del examen:

Por ser un procedimiento en que se necesita realizar una punción lumbar, tiene las mismas contraindicaciones que esta. Se dividen en:

a) Absolutas: edema, tumor cerebral y,

b) sospecha de hemorragia subaracnoidea, infección de tejidos en zona de punción, defectos en columna vertebra, transtornos de la coagulación o un número menor a 50.000/ µl de plaquetas.

5.- Resultado que entrega el exámen:

Los agentes que pueden detectar las pruebas de aglutinación van depender del kit que se utilice en el laboratorio correspondiente, aunque generalmente son los siguientes: E. coli K1, N. meningitidis A, B, C, D, Y, W135, H. Influenzae, S. pneumoniae, S. agalactiae.

6.- Interpretación del resultado de exámen:

Los resultados de este examen se informan como positivo o negativo según el agente que corresponda.

7.- Signos de alarma:

No olvidar los signos y síntomas meníngeos, pues la sospecha clínica inicial es esencial en el manejo posterior. La meningitis aguda es un cuadro que posee alta morbimortalidad, por lo cual las pruebas que nos permitan diagnosticarla precozmente influyen directamente en el pronóstico. No olvidar que el tratamiento antibiótico precoz se debe comenzar inmediatamente luego de la sospecha y se deben cubrir los agentes más probables según clínica, edad y co-morbilidades. Las pruebas de aglutinación de latex nos van a permitir detectar el agente etiológico con lo que podremos ir ajustando el esquema antibiótico según sea necesario.

8.- Riesgos del examen

Los riesgos se asocian a las complicaciones propias de la punción lumbar: cefalea, dolor de espalda en el lugar de la punción, dolor radicular.

9.- Bibliografía

1) Merino R, Gajewski P. Medicina Interna Basada en la Evidencia. 1ª ed. Polonia. Medycyna Praktyczna, 2015.

2) Del Valle M, Hanning S, Vial P. Identificación rápida del agente etiológico mediante prueba de aglutinación de látex en meningitis aguda bacteriana. Rev. Chil. Pediatr. 1985; 56 (3): 159-161.

1.- Definición del exámen

El estudio parasitológico de deposiciones es un exámen que identifica y diagnostica las principales enteroparasitosis. Se realiza a través de la extracción de una muestra de depósitos, pero puede efectuarse en forma excepcional en el líquido biliar o aspirado duodenal, esta muestra puede ser seriado (3 a 6 muestras), o de sólo una muestra (examen rápido y directo, utilizado en urgencias para pacientes inmunocomprometidos). Se pueden utilizar diversos métodos donde las técnicas de uso más habitual en Chile son: Teleman modificado, Burrows o PAF. Donde el objetivo principal es la visualización directa del parásito.

Ventajas:

No invasivo.

Permite el diagnóstico de laboratorio de la mayoría de las enteroparasitosis y algunas a histoparasitosis como la fascioliasis fascioliasis.

De bajo costo.

Relativamente simple.

Buena sensibilidad.

Desventajas:

Toma de muestras seriadas, implica excesivo tiempo consulta tiempo consulta-resultado.

Altamente dependiente del operador.

Extenuante observación microscópica.

2.- Forma de realización del examen

Se realiza a través del análisis de 3 deposiciones día por medio, en urgencias o deposiciones disentéricas 1 muestra. Tomar más de una muestra aumenta considerablemente las posibilidades de encontrar.

• Muestras frescas: se estudian muy escasamente, sirven para detectar parásitos vivos (trofozoitos de E. histolytica) o practicar algún método de cultivo ( Strongyloides).
• Muestras preservadas: son la gran mayoria. Es el procedimiento más recomendado. Conservan los parásitos, impiden el deterioro de la muestra (inactivan proteínas como las enzimas coagulándolas.

Reactivo base: Formalina. Concentración habitual al 5-10%, Importante: es tóxico.

ü  Tipos :

ü  Formol-sal (el más simple, contiene formalina y cloruro de sodio).

ü  P.A.F (de mejor calidad para preservar trofozoitos, pero de mayor costo, contiene fenol, alcohol etílico y formalina en solución isotónica).

La visualización de la muestra es analizada macroscópicamente (visualización directa) o microscópica( a través de una muestra obtenida por métodos Teleman modificado(más usado en chile), Burrows o PAF a través de microscopia óptica.

• Macroscópica: sirve para constatar algunas características físicas de las deposiciones, como consistencia o presencia evidente de sangre mucosidades o restos de alimentos sin digerir. Permite la detección de algunos gusanos (Ascaris, Enterobius) o parte de estos como proglótidas de Taenia
• Microscópico: protozoos, huevos y larvas de helmintos.

Consideraciones:

• Sirven las emitidas a cualquier hora del día.
• Recolectarla en un recipiente limpio y seco.
• En lactantes (del pañal, pero recién emitidas)

No sirven:

• Las mezcladas con orina
• Que contenga bario, material radiográfico, purgantes oleosos, antibióticos o antiparasitarios

TABLA 1 tecnicas para cada agente etiológico. (*) deben ser pedidos por médico.

3.- Cuáles son las indicaciones del exámen

Este examen se utiliza para:

Enterobiosis (Enterobios vermicularis)

Ascariosis (áscaris lumbicoides)* es de elección

Tricocefalosis(Tricuris trichiura)* de elección

Estrongiloidosis(Strongyloides stercolaris)* de elección

Himenolepiosis(hymenolepis nana)* de elección

Teniosis(teniosis saginata, Teniosis solium)

Difilobotriosis(Diphyllobothrium latum)

Amebiosis(Entamoeba histolytica)* de elección

Giardiosis(giardia intestinalis)* eleccion

Blastocistosis(Blastocystis Hominis)* de elección

Criptosporidiosis(Cryptosporidium spp)* de eleccion

Isospoosis(Isospora belli)* de elección

II.- Estudio de los siguientes síntomas o signos clínicos:

Diarrea crónica, disentería en inmunocomprometidos.

4.- Contraindicaciones del examen:

No existen contraindicaciones.

5.- Resultado que entrega el exámen:

Enterobiosis (Enterobios vermicularis): visualización de los huevos, pero debemos recordar que el examen de elección es el test de Graham, no siendo EPSD un buen método.

Ascariosis (áscaris lumbicoides): se observan Huevos.

Tricocefalosis(Tricuris trichiura): se observan huevos característicos.

Estrongiloidosis(Strongyloides stercolaris): se observan larvas microscópicas.

Himenolepiosis(hymenolepis nana): huevos característicos con aspecto de huevo frito.

Teniosis(teniosis saginata, Teniosis solium): se observan huevos de taenia sp que solo indica que está infectado con una taenia pero no se puede diferenciar entre T. solium y T saginata.

Difilobotriosis(Diphyllobothrium latum): Visualización de huevos.

Amebiosis(Entamoeba histolytica): visualización de huevos

Giardiosis(giardia intestinalis): trofozoitos y quistes.

Blastocistosis(Blastocystis Hominis): Formas vacuoladas

Criptosporidiosis(Cryptosporidium spp): ooquistes con tinción de Ziehl Neelsen

Isospoosis(Isospora belli): ooquistes con tinción de Ziehl Neelsen o técnicas de flotación.

6.- Interpretación del resultado de exámen:

En encontrar parasitos en deposiciones es patognomónico de infección por lo que debe empezar tratamiento. Según parasito encontrado iniciar tratamiento:

Albendazon o mebendazol: Enterobiosis, Ascariosis, Tricocefalosis, Estrongiloidosis

Prazicuantel: Himenolepiosis, Teniosis, Difilobotriosis(Diphyllobothrium latum)

Metronidazol: Amebiosis,Giardiosis, Blastocistosis

Nitozoxanida: Criptosporidiosis

Cotrimozacol: Isospoosis

7.- Signos de alarma:

Criptosporidiosis(Cryptosporidium spp) y Isosporosis(Isospora belli) considerar compromiso inmune.

8.- Riesgos del examen

No existen riesgos

9.- Bibliografía

Apunte equipo docente, parasitología médica, AVE medicina 2014

Examen parasitológico seriado de deposiciones fundamentos teóricos.

1.- Definición del exámen

El cultivo de heridas o absceso es un exámen que permite detectar la presencia de baterías u hongos, se realiza mediante la extracción de una muestra, su siembra en un medio de cultivo, tinción gram y visualización microscópica, y posteriormente un antibiograma para determinar sensibilidad antibiótica.

2.- Forma de realización del examen

Heridas: Se realiza a través de una torula la cual debe muestrear un área de aproximadamente 1 cm2 de los bordes de la herida o de la base de la lesión. No se debe frotar con fuerza para evitar el sangrado. En el caso de heridas muy secas, se recomienda impregnar la torula con suero salino estéril antes de realizar la toma. Se recomienda que la torula sea de alginato. Se enviar en un medio de transporte como el medio sturart.

Abscesos: se recomienda aspirar el absceso con jeringa y aguja, preferiblemente a través de una zona de piel sana. Si así no se obtuviera una muestra, se puede inyectar suero salino estéril y volver a aspirar. Una vez realizada la aspiración se debe expulsar el aire, tapando la aguja con una gasa estéril impregnada en alcohol para eliminar el riesgo de aerosoles. A continuación, se debe cambiar la aguja por otra punta estéril e inocular el contenido, previa desinfección del tapón de goma, en un medio de transporte como tiogliconato.

Posterior a esto las muestras deben sembrarse en un periodo no mayor a 24 hrs en medios específicos y no mayor a 1 hr en medios de transportes estériles. Los medios de cultivos usados son: agar sangre, agar chocolate, agar MacConckey y agar tiogliconato. Posteriormente son teñidos con tinción Gram para ver la morfología.

En chile los cultivos realizados son cualitativos, los cultivos cuantitativos tienen altos costos.

Es importante que al momento del examen la herida se debe lavar por arrastre para luego tomar la muestra.

3.- Cuáles son las indicaciones del exámen

Infecciones de herida quirúrgica

Infecciones de mordeduras

Infecciones de quemaduras

Infecciones de ulceras por presión

Infección pie diabético

Faceitis necrotizante

Celulitis purulenta

II.- Estudio de los siguientes síntomas o signos clínicos:

dolor, hinchazón, calor o enrojecimiento alrededor de la herida, secreción de un líquido de olor desagradable o pus, fiebre, sensación de malestar general, si la infección se ha diseminado o si ha estado presente por algún tiempo

4.- Contraindicaciones del examen:

Este examen no tiene contraindicaciones

5.- Resultado que entrega el exámen:

El resultado del medio de cultivo para expectoración será la presencia de bacteria (+) o no(-) de manera cualitativa, y además el antibiograma su respectiva sensibilidad.

En la tabla N°1 Se muestran las distintas bacterias que da resultado el examen según batería básica de cultivos.

En la tabla N°2 se muestran algunos medios de cultivo específicos para algunas baterías las cuales al momento de pedir el examen deben ser especificadas.

Cultivos específicos

6.- Interpretación del resultado de exámen:

La interpretación del resultado siempre debe estar en correlación con la clínica del paciente, el uso previo de antibióticos, el origen de la herida, el antibiograma siempre se debe tener en cuenta la penetrantica que tiene el antibiótico a los tejidos.

7.- Signos de alarma:

infecciones polimicrobianas y anaerobios en un contexto de fasceitis necrotizante siempre es un factor de riesgo ya que contempla la intervención de urgencia quirúrgica

infecciones por hongos ya que generalmente se da en pacientes inmunodeprimidos

8.- Riesgos del examen

No presenta riesgos

9.- Bibliografía

Cercenado E; Cantón E, Diagnóstico microbiológico de las infecciones de piel y tejidos blandos 2 0 0 6

Manual microdiagnostica tercera edición disponible en http://www.lablinsan.cl/manual/MANUAL_PARTE_1.pdf

1.- Definición del exámen

El cultivo de expectoración es  una herramienta para el diagnóstico etiológico de enfermedades del árbol bronquial inferior, pues permite identificar bacterias u hongos en secreción del árbol bronquial inferior, a través de un cultivo, visualización microscópica, y posteriormente un antibiograma para determinar sensibilidad.

2.- Forma de realización del examen

Se realiza a través del análisis de una muestra de expectoración obtenida a través de una tos profunda, no saliva. La expectoración se recoge en un recipiente estéril que es proporcionado por el laboratorio.

Generalmente, el primer paso en el análisis de rutina de una muestra de esputo es realizar una tinción de Gram que será fundamental en determinar si la muestra es apta para el cultivo.

A continuación, la muestra se coloca en un medio nutritivo que dentro de la batería básica esta: Agar sangre, Agar mac Conkey, Tioglicolato, Agar chocolate. Estos se incuban a 35° 48 hrs. Los medios nutritivos estimulan el crecimiento de las bacterias presentes, lo que permite la aplicación de pruebas adicionales y visualización bajo microscopio.

Se recomienda lavarse los dientes y enjuagarse la boca con agua antes de la recogida de la muestra y evitar comer ningún alimento durante 1-2 horas antes de la recoger la muestra.

Según sospecha diagnostica medico puede pedir otros medios de cultivo.

3.- Cuáles son las indicaciones del exámen

Este examen se utiliza para:

1. Estudiar agentes involucrados en neumonía
2. Bronquitis bacteriana
3. Reagudización de epoc
4. Reagudización de fibrosis quística

II.- Estudio de los siguientes síntomas o signos clínicos:

Síndrome febril, sudoración nocturna, anorexia, baja de peso, tos productiva o irritativa, hemoptisis, disnea, dolor torácico.

4.- Contraindicaciones del examen:

No tiene contraindicaciones

5.- Resultado que entrega el exámen:

El resultado del medio de cultivo para expectoración será la presencia de bacteria (+) o no(-) de manera cualitativa, y además el antibiograma su respectiva sensibilidad.

En la tabla N°1 Se muestran las distintas bacterias de bacteria que dar de resultado este examen según batería básica de cultivos.

En la tabla N°2 se muestran algunos medios de cultivo específicos para algunas baterías las cuales al momento de pedir el examen deben ser especificadas.

Cultivos específicos

6.- Interpretación del resultado de exámes:

Para interpretar este examen hay que tener algunas cosas en consideración:

1.- La sesibilidad es 45-60%y la especificidad es de 60%. Por lo que es importante que una muestra negativa no nos va a descartar una infección, tampoco una muestra positiva por lo que los resultados siempre deben estar en correlación con la clínica del paciente.

2.- El tracto respiratorio alto, hasta el nivel de la faringe es el origen de la gran mayoría de las contaminaciones de muestras. La flora normal de la oronasofaringe incluye 200 especies de anaerobios, anaerobios facultativos y bacterias aerobias. El árbol traqueobronquial es normalmente estéril o posee una escasa contaminación en pacientes sanos. La frecuencia de colonización y la concentración de microorganismos aumentan en pacientes con enfermedades bronquiales crónicas, neoplasmas broncogénicos, aspiración crónica, traqueotomía, o intubación endotraqueal

3.- La terapia antimicrobiana reduce la posibilidad de aislar bacterias susceptibles de cualquier muestra de espectoración.

4.- Hay microorganismos que siempre son considerados patógenos, cualquiera sea el origen de la muestra. Estos microorganismos incluyen: Mycobacterium tuberculosis, Mycoplasma pneumoniae, hongos patógenos como Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma. La mayoría de los virus respiratorios y Legionella spp.

6.- el antibiograma nos muestra la sensibilidad de las distintas bacterias pero siempre tenemos que tener en consideración la cantidad de antibióticos que llega al tejido.

7.- En resultados negativos con sospecha clínica persistente, buscar infecciones con cultivos específicos.

7.- Signos de alarma:

Infecciones por hongos el paciente puede tener compromiso inmunológico.

Infecciones por micoplasma realizar cultivo de koch por posible tuberculosis

8.- Riesgos del examen

No

9.- Bibliografía

– Meseinger Peinado M.Diagnóstico microbiológico de las infecciones bacterianas del tracto respiratorio inferior 2 0 0 7

-Manual microdiagnostica tercera edición disponible en